Mi a célja az elsődleges antitestnek a Western blot vizsgálat során?
Mi a célja az elsődleges antitestnek a Western blot vizsgálat során?

Videó: Mi a célja az elsődleges antitestnek a Western blot vizsgálat során?

Videó: Mi a célja az elsődleges antitestnek a Western blot vizsgálat során?
Videó: Вестерн-блоттинг - теория и метод 2024, Július
Anonim

A közvetlen kimutatási módszerrel enzim- vagy fluorofór-konjugált elsődleges antitest a kívánt antigén kimutatására szolgál a folt . A közvetett észlelési módszerben egy címkézetlen elsődleges antitest először az antigénhez való kötődésre használják.

Továbbá, mi az elsődleges antitest a Western blot -ban?

Az elsődleges antitest felismeri és megköti a kérdéses fehérje epitópját vagy specifikus aminosavszekvenciáját. Másodlagos antitestek használt western blotting jellemzően enzimmel konjugáltak; a leggyakrabban használt enzimek a tormaperoxidáz (HRP) és az alkálifoszfatáz (AP).

Ezenkívül mit csinál az elsődleges antitest? Az elsődleges antitestek olyan immunglobulinok, amelyek specifikus antigénhez kötődnek ( fehérje , peptid, kis molekula stb.), és jellemzően nem konjugáltak. Egy jó elsődleges antitest nagy affinitással és specifitással felismeri és megköti az antigén tisztítását, kimutatását és mérését.

Következésképpen mi a célja a Western blotnak?

A western blot egy laboratóriumi módszer, amelyet specifikus fehérjemolekulák kimutatására használnak fehérjék keverékéből. Ezután a fehérjemolekulákat méretük szerint választják el gél -elektroforézisnek nevezett módszerrel. Az elválasztást követően a fehérjéket a gélről a foltosodás membrán.

Hogyan használják az antitesteket a Western blot -vizsgálat során?

Antitestek vannak használt célfehérjék kimutatására a western blot (immunoblot). Az antitestek fluoreszcens vagy radioaktív címkékkel vagy enzimekkel vannak konjugálva, amelyek ezt követően reagálnak egy alkalmazott reagensre, ami színezést vagy fénykibocsátást eredményez, lehetővé téve az észlelést.

Ajánlott: